葉綠素含量測定方法是什么？葉綠素含量測定步驟是什么？

如果溶液中有數種吸光物質，則此混合液在某一波長下的總吸光度等丁各組分在相應波長下吸光度的總和，這就是吸光度的加和性。今欲測定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類胡蘿卜素的含量，只需測定該提取液在三個特定波長下的吸光度A，并根據葉綠素a、b及類胡蘿卜素在該波長下的吸光系數即可求出其濃度。在測定葉綠素a、b時，為了排除類胡蘿卜素的干擾，所用單色光的波長選擇葉綠素在紅光區的最大吸收峰。已知葉綠素a、h的80%丙酮提取液在紅光區的最大吸收峰分別為663 nm 和645 nm，又知在波長663 nm下，葉綠素 a、b在該溶液中的吸光系數分別為82.04和9.27，在波長645 nm下分別為16.75和45.60。

葉綠素含量測定步驟是什么?

(1)取新鮮植物葉片(或其他綠色組織)或干材料，擦凈組織表面污物，剪碎(去掉中脈)，混勻。

(2)稱取剪碎的新鮮樣品0.2g，共3份，分別放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉及2~3mL95%乙醇(或80%丙酮)，研成勻漿，再加乙醇10mL，繼續研磨至組織變白。靜置3~5min。

(3)取濾紙1張，置漏斗中，用乙醇濕潤、沿玻棒把提取液倒入漏斗中，過濾到25mL棕色容量瓶中，用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘渣數次，最后連同殘渣一起倒入漏斗中。

(4)用滴管吸取乙醇，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中，直至濾紙和殘渣中無綠色為止。最后用乙醇定容至25mL，搖勻。

(5)把葉綠體色素提取液倒人光徑1 cm的比色杯內。以95%乙醇為空白，在波長665nm、649mm和470nm下測定吸光度。

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